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甘膽酸測定測定原理

來源:http://www.cqszjj.com/news947821.html 發(fā)布時間:2023/6/9 14:36:00

       甘膽酸測定測定原理:甘膽酸(GCA)是膽汁中的主要膽鹽成分,在肝臟和膽囊中合成,由膽汁排入腸道,經(jīng)小腸上皮細(xì)胞攝取后經(jīng)門靜脈進(jìn)入肝臟。正常情況下,門靜脈系統(tǒng)中的 GCA被肝細(xì)胞攝取并在肝細(xì)胞內(nèi)合成膽固醇酯,經(jīng)門靜脈系統(tǒng)進(jìn)入肝臟的血液中。膽汁酸在膽汁中含量很低,血漿中濃度也很低,因此利用測定血漿中膽酸含量來間接反映膽道梗阻程度。

       檢測方法:用內(nèi)標(biāo)法定量測定。取血漿25 mL,加入內(nèi)標(biāo)物9 mL (1 mmol/L),用0.45μm微孔濾膜濾過,加入1.0 mL重鉻酸鉀溶液,振搖30 min,濾過后取上清液1 mL經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過,作為空白對照液。取10 mL注入液相色譜儀,按外標(biāo)法定量檢測血漿中的甘膽酸。

       樣品前處理:取標(biāo)本在4℃冰箱中保存。標(biāo)本采集后立即迅速置于室溫下4℃冰箱中保存(以甘膽酸為標(biāo)準(zhǔn)品)。

       樣品測定:取標(biāo)本30 mL加內(nèi)標(biāo)物9 mL于50 mL容量瓶中,用0.45μm微孔濾膜濾過后取上清液1 mL加入10 mL重鉻酸鉀溶液和0.1 mol/L的 NaOH溶液混合液(1 mol/L)振搖30 min,再加入1.0 mL重鉻酸鉀溶液和0.1 mol/L的 NaOH溶液混合液(1 mol/L)振搖30 min后取上清液1 mL加入10 mL重鉻酸鉀溶液和1.0 mL NaOH溶液混合液(1 mol/L)振搖30 min,再加入1.0 mL重鉻酸鉀溶液和0.1 mol/L的 NaOH溶液混合液(1 mol/L)振搖30 min后取上清液1 ml入小量瓶中。