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400-876-2378目前已有多種實(shí)驗(yàn)室手段對(duì) PCT進(jìn)行檢測,這些方法既能定性也能定量。降鈣素原檢測通常有以下幾種方式:
1.放射免疫學(xué)分析法
利用人工合成的多克隆抗體特異地識(shí)別和連接合成氨基酸降鈣素原。該方法能檢測正常人的血清PCT,可靠敏感度為4pm/mL,檢測的是游離PCT、結(jié)合型PCT和降鈣素基因相關(guān)肽前體的混合物,而不能區(qū)分上述三種物質(zhì)。該法檢測耗時(shí)長(19~22h),而且有放射性元素的污染使用受到限制。
2.雙抗夾心免疫化學(xué)發(fā)光法(ILMA)
運(yùn)用雙單克隆抗體,其中一個(gè)抗體為降鈣素抗體,另一個(gè)為抗鈣素抗體,分別結(jié)合到PCT分子的降鈣素和抗鈣素部位,可排除交叉反應(yīng)。其中一個(gè)抗體是光標(biāo)記的,另一個(gè)未標(biāo)記的抗體固定在試管的內(nèi)壁,反應(yīng)過程中兩個(gè)抗體與PCT分子結(jié)合而形成三明治復(fù)合體,發(fā)光部位于反應(yīng)管的表面。該法操作簡便,特異性強(qiáng),敏感性高,測定的低限值為0.1ng/mL,2h可以出結(jié)果。
3.膠體金比色法(B.R.A.H.M.SPCT-Q-半定量快速實(shí)驗(yàn))
采用膠體金技術(shù),包括膠體金標(biāo)記的抗抗鈣素的單克隆抗體和用作包被的抗降鈣素多克隆抗體,當(dāng)標(biāo)本(血清或血漿)加人標(biāo)本孔,金標(biāo)單克隆抗體與標(biāo)本中的PCT結(jié)合,形成金標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物。該復(fù)合物在反應(yīng)膜上移動(dòng),與固定在膜上的抗降鈣素抗體結(jié)合形成更大的復(fù)合物。當(dāng)PCT濃度超過0.5ng/mL,該復(fù)合物顯示紅色,紅色的深淺與PCT的濃度成正比,與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較即可得出PCT的濃度范圍。結(jié)果分為四級(jí):正常<0.5ng/mL;輕度升高>0.5ng/mL;明顯升高>2ng/mL;顯著升高>10ng/mL。該法具有快速簡便,易觀察的特點(diǎn)。
4.透射免疫濁度法
樣品中的PCT與試劑中的PCT單克隆抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng),使反應(yīng)液濁度增加,并在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液濁度與所加人抗原的量呈線性關(guān)系,可使用生化分析儀或其它光學(xué)檢測儀器在6O0nm波長處測定反應(yīng)液吸光度值,反應(yīng)液吸光度值與所測PCT濃度成正比。該測定方法簡便、快速,可自動(dòng)化,適合于批量檢測。2005年國內(nèi)已有研制開發(fā)的PCT免疫比濁試劑盒供應(yīng),為PCT的廣泛應(yīng)用提供了方便條件。雖然免疫透射比濁的方法學(xué)及臨床應(yīng)用尚需做進(jìn)一步的驗(yàn)證,但其應(yīng)用前景非??春谩?/p>
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